產品介紹:
最短的時間內獲得答案,智能化的工作流程,廣泛的測序應用范圍
Illumina公司推出的MiSeq是目前唯一一臺在單個儀器上整合了擴增、測序和數據分析的新一代測序儀,每次運行能產生超過1 Gb的數據,且占地面積僅為2平方英尺。MiSeq有著革命性的流程和無可比擬的準確性,這讓它成為快速且經濟高效的遺傳分析的理想平臺,適合廣泛的應用。同時根據Illumina的最新消息,今年9月份左右,MiSeq系統的測序通量將會升級至7G左右。升級將通過兩個方面完成,一個是cluster密度的增大,升級后cluster密度將會增加至12-15million,而pair-end讀取的reads數目將會增加至24-30million;另一方面是通過測序讀長而提升通量,屆時測序讀長會達到2*250bp,同時測序速度也會有所提升。目前,Broad研究院已經利用現有試劑實現了單端測序300bp讀長,Illumina目前內部測序更是完成了2*400bp的pair-end測序。而這些,都是保證在高質量數據結果的前提下完成的。
MiSeq性能參數
1.技術規格
▲1.1高數據通量:每輪反應最高可生成15G的有效數據;通量可以根據不同要求調整;
1.2每次運行可生成可讀2500萬個測序片段標簽序列;
1.3每輪實驗運行成本:測序150億(15G)個堿基對所需成本不高于2000美元;成本包含了從樣本前期建庫-克隆擴增-測序-數據分析的所有成本;
▲1.4有效數據讀長:單端讀取序列,讀長可達300個堿基;雙端讀取序列:讀長可達2x300個堿基 。讀長可根據不同的應用而調整;
▲ 1.5 拼接前原始數據質量評判采用的測序質量標準為Q30,并且高于Q30的堿基比例是整個運行的平均結果;
▲1.6實驗流程:樣本文庫制備只需要90分鐘。之后在同一系統中直接開展自動克隆擴增-測序-數據分析。整個過程不需要繁瑣的emulsion 實驗,人工干預的時間少于1小時;
▲1.7無需單獨的擴增設備,所有樣本的克隆擴增, 測序到數據分析都在同一臺儀器中自動完成,無需人工干預;
1.8 多重擴增子測序的每次反應最多可同時檢測384個樣本,每個樣本可同時分析1536條產物??筛鶕煌瑢嶒炐枰x擇樣本通量;
1.9 廠家能夠提供商品化的應用試劑供用戶日常選擇使用,比如:
檢測自閉癥的試劑;
檢測靶向主要是針對生殖細胞存在的與腫瘤相關基因的試劑;
檢測遺傳性疾病的試劑,能夠重點關注嬰幼兒早期嚴重的、隱形遺傳??;
1.10 儀器具備以下軟件分析功能:
? 全基因組重測序
? 定向重測序,包括但不限于下列方法:
o TruSeq 自定義捕獲
o TruSeq 自定義擴增子測序
o 長距離片段
o 分子倒置探針
? De novo 測序
? 序列特異DNA結合蛋白的ChIP-Seq
? 組蛋白修飾和表觀遺傳標記的ChIP-Seq
? 亞硫酸氫鹽處理DNA的測序,DNA甲基化研究
? 宏基因組學研究
? mRNA測序
? 基于標簽的基因表達
? 小RNA測序
? 核糖體圖譜分析
? DNase I 超敏位點定位研究
? 核小體定位和染色質結構研究研究
? CLiP-Seq:研究序列特異的蛋白-RNA相互作用研究
? CNV-Seq:用測序測定拷貝數變異研究
? GRO-Seq:研究RNA聚合酶起始研究
? 降解DNA樣品的測序
? 末端配對mRNA測序
? DNA印跡和等位基因特異的表達
2配置要求
2.1能符合上述指標的測序系統主機1套,包括了樣本文庫自動擴增和數據分析功能;儀器控制服務器配置:Intel Core i7-2710GE 2.10GHz CPU,16GB RAM,750G硬盤,采用Win7 Embedded Standard操作系統;
2.2 96孔磁力架
2.3 核酸蛋白定量儀Qubit
2.4配套控制軟件;
2.5 配套分析報告軟件:開展完整的數據分析無需用戶干預,從質量打分的堿基檢出到變異體檢出和比對所需時間小于4小時;
2.6 相關儀器調試用試劑;
2.7 必需的附件、配件及專用工具等;
3.技術文件
3.1儀器操作使用手冊;
3.2儀器維護的有關資料;
工作流程
4大特性
1、最短的實驗周期:從樣品制備開始只需要8小時即可得到超過100M的高質量測序結果。
2、最便捷的樣品制備流程:只需50ngDNA模板,2小時的自動化操作就可以完成全部樣品制備工作。
3、最精確的測序原理:MiSeq繼續GA和HiSeq平臺的邊合成邊測序的化學原理,數千篇高質量的國際期刊文章是對Illumina NGS平臺測序結果可信度最有力的證明。
4、最完整的整合功能:MiSeq可以獨立完成簇生成,雙向測序及數據分析工作,讓經費和實驗室空間不再成為NGS研究的障礙。
應用范圍
1、轉錄組測序
派森諾MiSeq測序平臺是基因組已測序物種的轉錄組分析最佳平臺。公司技術團隊目前已完成了包括斑馬魚在內的多種植物、動物的轉錄組測序及分析。
2、宏基因組16S rDNA單V區測序
對16s rDNA的單V區(V3\V4)進行高通量測序,鑒定細菌群和古生菌群。派森諾的技術團隊使用Illumina MiSeq測序16S rDNA V4區并結合Roche 454 FLX+測序16S rDNA V1~V3區成功的對雞的腸道環境細菌進行了鑒定。
3、Small RNA測序
1*35bp的讀長完美地配合了小RNA的測序長度,速度快,靈敏度高。派森諾的技術團隊目前已完成了鵝的小RNA測序和多種中草藥的小RNA測序。
4、重測序:
包括全基因組重測序、簡化基因組測序、外顯子測序。
Illumina MiSeq非常適用于對微生物基因組的重測序,每次運行即可完成一個微生物基因組測序。2011年12月27日,派森諾的技術團隊利用MiSeq一次運行同時完成了乳酸菌
(Lactobacillus casei Zhang和Lactobacillus casei P8)的重測序,基因組覆蓋深度為分別為404倍和213倍,比對至參考序列,基因組覆蓋率為100%,同時檢測到了多種結構變異,包括插入、缺失和SNP位點,并且檢測到了全部質粒。